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用鼠尾膠原蛋白進(jìn)行膠原收縮測(cè)定

發(fā)布時(shí)間: 2023-11-23  點(diǎn)擊次數(shù): 1246次

用鼠尾膠原蛋白進(jìn)行膠原收縮測(cè)定

ACOX3 功能障礙是頸內(nèi)動(dòng)脈復(fù)發(fā)性自發(fā)性血管痙攣的潛在原因

使用的先進(jìn) BioMatrix 產(chǎn)品:

RatCol® I 型鼠尾膠原蛋白 (4 mg/ml) 和中和溶液(包含在鼠尾膠原蛋白試劑盒中)

產(chǎn)品的使用方式:

我們的膠原蛋白用于形成 3D 水凝膠,并用 HASMC 播種/嵌入。作為膠原蛋白收縮測(cè)定的一部分,每 24 小時(shí)測(cè)量一次膠原蛋白水凝膠。

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文章摘要:

顱外頸內(nèi)動(dòng)脈復(fù)發(fā)性自發(fā)性血管痙攣(RSV-eICA)是導(dǎo)致年輕人缺血性卒中的一個(gè)鮮為人知的原因。然而,其病理生理學(xué)仍然很大程度上未知。通過(guò)對(duì)受 RSV-eICA 影響的兩個(gè)韓國(guó)異卵雙胞胎兄弟的 ACOX3 基因進(jìn)行全外顯子組測(cè)序,我們鑒定了兩種復(fù)合雜合錯(cuò)義變異 c.235 T >G (p.F79 V) c.665G>A (p.G222E) )。計(jì)算機(jī)分析表明,這兩種變體均被歸類為致病性。體外 ACOX3 酶測(cè)定表明 F79 V G222E 突變體實(shí)際上沒(méi)有酶活性。為了確定突變體對(duì)血管痙攣的影響,我們對(duì)人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HASMC)進(jìn)行了膠原收縮測(cè)定。

Carbachol 是一種膽堿能激動(dòng)劑,可誘導(dǎo) HASMC 收縮。使用 siRNA 敲低 HASMC 中的 ACOX3,可顯著抑制由卡巴膽堿引發(fā)的 HASMC 收縮。通過(guò)編碼siRNA抗性野生型ACOX3的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,卡巴膽堿誘導(dǎo)的HASMC收縮得到恢復(fù),但通過(guò)ACOX3 G222E轉(zhuǎn)染或ACOX3 F79VACOX3 G222E共轉(zhuǎn)染則不能恢復(fù),表明兩種ACOX3突變體抑制卡巴膽堿誘導(dǎo)的HASMC收縮。我們認(rèn)為 ACOX3 功能障礙會(huì)引起基底主動(dòng)脈肌源張力的長(zhǎng)期喪失。結(jié)果,頸內(nèi)動(dòng)脈中間段的平滑?。ㄆ渲薪桓猩窠?jīng)支配特別豐富)變得對(duì)擬交感神經(jīng)刺激(例如劇烈運(yùn)動(dòng))過(guò)敏,導(dǎo)致復(fù)發(fā)性血管痙攣。因此,ACOX3功能障礙可能是RSV-eICA的致病機(jī)制。我們第一次報(bào)道了 ACOX3 可能參與維持人動(dòng)脈平滑肌的基礎(chǔ)肌源張力。

北京和生物科技有限公司專業(yè)代理  advancedbiomatrix  產(chǎn)品,專營(yíng)進(jìn)口生物試劑,科學(xué)儀器,實(shí)驗(yàn)消耗品,化工原料及藥物中間體等。公司與諸多國(guó)外品牌簽下代理,sigma、santaRD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegend、ebioscience、saracarepolyplus、Beyotime、Novus、moltox等,能為廣大科研用戶提供數(shù)萬(wàn)種試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)消耗品。

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